期刊简介
本杂志是心血管学领域新兴学科的专业性学术期刊，在国内心血管心律失常方面具有重大影响和享有较高的学术权威。面向广大的医务人员，特别是心血管专业的医务工作者，介绍心脏起搏、心电生理、心律失常学科的国内外重要进展，以及新的诊疗技术、防治经验等。多次荣获国家及湖北省优秀期刊，影响因子排序在同类期刊中名列前茅。
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首页>中国心脏起搏与心电生理杂志
- 杂志名称：中国心脏起搏与心电生理杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中国生物医学工程学会 武汉大学人民医院
- 国际刊号：1007-2659
- 国内刊号：42-1421/R
- 出版周期：
期刊荣誉：1997年获第二届全国优秀科技期刊期刊收录：
mHCN4基因修饰小鼠骨髓间充质干细胞重建起搏离子流通道
仝识非；宋治远；姚青；万瑛；邹丽云；钟理
关键词：电生理学, 间充质干细胞, 超极化激活的环核苷酸门控通道, 小鼠, 起搏离子流
摘要：目的 观察超极化激活的环核苷酸门控通道亚型4(mHCN4)外源基因对小鼠骨髓间充质干细胞(mMSCs)的转染及其功能表达.方法 2个月大昆明小鼠拉颈处死,无菌条件下分离股、胫骨,收集骨髓细胞种植于塑料培养瓶,24 h后更换培养液,保留贴壁细胞,待细胞达90%融合时胰酶消化传代培养.收集第3代贴壁细胞,用免疫磁珠法分选CD11b-细胞继续扩增培养.以pUC18、pcDNA3-mHCN4、pIRES2-EGFP、pMSCV-puro等质粒载体为架构,用不同酶类将目的片段连接构建pMSCV-mHCN4-EGFP及pMSCV-EGFP逆转录病毒载体.载体转染PT67包装细胞,收集逆转录病毒上清转染第3代扩增的mMSCs细胞,观察mMSCs的转染效果及阳性转染细胞的mHCN4通道动力学特性.结果 mMSCs的转染效率约10%～20%.mHCN4基因转染组可记录到明显的时间依赖性的超极化激活内向电流(If),If的半数大激活电压为-99.0±5.8 mV,在-140 mV电压时的激活时间常数为451±61ms.该电流对CsCl高度敏感;对照组细胞在超激化状态下无明显的电流出现.结论 mHCN4外源基因可在mMSCs中成功表达起搏离子流通道,基因修饰后的mMSCs有可能成为一种有效的生物起搏种子细胞.
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